发布时间：2021/5/26 17:23:02 阅读次数：683
ELISA（酶联免疫吸附剂测定）是一种快速 灵敏 准确可靠的一种定量分析方法,样本的处理对于ELISA实验的成功有着举足轻重的作用. 利用ELISA进行检测的样本类型包括常见的血液（血清 血浆）,组织匀浆 细胞裂解液 细胞培养上清以及不常见的皮肤组织 尿液 粪便 肺泡灌洗液 唾液 脑脊液 胸腹水 前列腺液 精液 阴道分泌物等,这些样本收集的时间 处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果.下面就常见ELISA血液样本处理方法的整理,希望对您有所帮助.
血液采取后应尽快进行处理,使血清（浆）从与血细胞接触的全血中分离出来.
血清与血浆的区别：
血清是血液凝固后缺少纤维蛋原的血浆,故血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均等同于血清.
选择血清还是血浆样本？
由于血清中缺乏很多的凝血因子,但有一些凝血产物,如果是测凝血因子建议选择血浆样本；同时血浆中有纤维蛋白原,如果纤维蛋白原对待检测指标有影响,建议选择血清样本.大多数情况下二者均可以选择.
处理方法：
♦ 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或 4 度过夜,然后 1000×g 离心 20分钟,取上清即可.这是一个让血液自然凝固的过程,温度温度越低,凝集越缓慢,可根据需要添加促凝剂.
♦ 血浆：血浆样本需要抗凝,一般建议用 2.0%EDTA,1%肝素,3.8%枸橼酸钠作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30 分钟内于2 ~8度 1000 g 离心15 分钟,取上清即可检测.根据待检测目标物的性质不同选取不同的抗凝剂.
处理样本的过程就是收集目标蛋白的过程,由于蛋白容易变性,降解,故该过程应尽量温和.样本处理之后的储存也非常重要,尤其注意不要反复冻融,样本处理之后可分装密封保存, 4 度保存应小于 1 周,-20 度不应超过 1 个月,-80度不应超过2个月.在标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解.样本的处理是实验成功的第一步, ,以上就是关于常见样本处理方法的一个简述,供研究者参考.
温馨提醒：
| 如果您选择的抗凝剂是 | 注意事项 |
| 枸橼酸钠 | Ca2+有凝血作用,枸橼酸钠能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物,从而阻止血液凝固.配成109mmol/L 的浓度和血液1:9,106mmol/L 的浓度和血液 1:4. |
| 乙二胺四乙酸（EDTA）盐 | 与血液中的钙离子结合形成配位化合物,从而阻止血液凝固.15g/L EDTA和血液 1:10. |
| 肝素 | 通过与抗凝血酶Ⅲ结合,增强抗凝血酶的作用,灭活丝氨酸蛋白酶,从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集,阻止血液凝固.肝素钠 1g/L与血液 1:10. |
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